Заказник расположен в юго-западной части Карельского перешейка, на территории сразу двух субъектов Российской Федерации — Санкт-Петербурга и Ленинградской области.

Ледник, который отходил здесь несколько десятков тысяч лет назад, поработал над внешним видом территории Гладышевского заказника. Благодаря ему сформировался причудливый ландшафт с богатой растительностью.
Специальной экологической тропы в заказнике нет, зато есть многочисленные, протоптанные людьми, тропинки. Во время прогулки будьте аккуратны: под ногами встречаются корни деревьев и камни.

Гладышевский заказник — настоящий птичий рай: пернатых здесь насчитывается более 120 видов. Это одна из немногих охраняемых территорий Петербурга, на которой встречается глухарь – самая крупная птица наших лесов. Глухарь занесён в Красную книгу Северной Столицы. А ещё в заказнике можно встретить все семь видов петербургских краснокнижных дятлов. Это малый пестрый дятел, белоспинный, трехпалый, вертишейка, седой дятел, зеленый и желна.
Гладышевский заказник является домом и для хищных птиц. Здесь обитает четыре вида сов: бородатая неясыть, длиннохвостая неясыть, мохноногий сыч и самая маленькая сова России – воробьиный сычик. Также встречаются ястреб-тетеревятник, обыкновенный осоед, чеглок, скопа. Все эти хищники занесены в Красную книгу Петербурга, а скопа – даже в Красную книгу России. Некоторые из этих редких пернатых хищников продолжают в заказнике свой род.

Уникальность местного ландшафта – это долины, поймы и крутые живописные овраги рек. А их здесь целых три: Рощинка, Гладышевка и Чёрная. Река Чёрная впадает в Финский залив. Это место особенно любимо водными и околоводными птицами. Например, оляпкой или водяным воробьём. Эта небольшая бурая птичка с белым передничком – единственная из воробьиных, которая способна плавать и даже нырять. Здесь можно встретить и крайне редкую для Петербурга птицу необыкновенной красоты – голубого зимородка. Размером он чуть больше воробья, а перья его переливаются синим и небесно-голубым цветом.

В мае-июне в реки заказника из Финского залива на нерест заходит минога. Это рыбообразное животное считается предшественником рыб. У неё нет воздушного пузыря и парных плавников. Челюсти, кстати, тоже отсутствуют. Рот – как у пиявки в виде присоски, с сотнями острых зубов. А вот глаза у миноги три. Третий находится на затылке и помогает животному определять, день сейчас или ночь. Минога живёт на нашей планете уже больше 350 миллионов и внешне практически не изменялась. В реки Гладышевского заказника миноги заходят раз в жизни, чтобы продолжить свой род.

Заказник Гладышевский — это единственное место не только в Санкт-Петербурге, но и на всём Карельском перешейке, где встречается популяция удивительного моллюска — жемчужницы европейской. Она же жемчужница жемчугоносная. В реке Гладышевке имеется несколько мест, где сохранилась популяция жемчужницы европейской.

На территории Гладышевского заказника встречается 34 вида млекопитающих. Здесь регулярно видят лосей. Поскольку Гладышевский непосредственно граничит с лесными массивами Ленинградской области, в его северной части возможны встречи даже с бурым медведем. Также в заказнике встречаются кабаны и барсуки. Из околоводных млекопитающих на реках охраняемой территории живут ондатры или мускусные крысы, самые крупные грызуны Европы – бобры.
Из пресмыкающихся в заказнике обитает веретеница ломкая — безногая ящерица. Здесь также можно встретить: например, гадюку обыкновенную, которая, как и веретеница, занесена в Красную книгу Петербурга.

В Гладышевском заказнике, как и на других особо охраняемых территориях Северной столицы, есть правила, которые необходимо соблюдать. Здесь запрещено разведение костров, туристические стоянки, передвижение на механических транспортных средствах.

Природный заказник «Гладышевский» – это одна из самых удаленных охраняемых территорий Петербурга. Добраться сюда можно на личном или общественном транспорте по Приморскому и Средневыборгскому шоссе.